Phương pháp phát hiện 4-metylimidazol bằng HPLC

Theo báo cáo của Financial Times vào ngày 4 tháng 7j88bet, cơ quan giám sát tại Anh - Trung tâm Sức khỏe Môi trường đã chỉ ra rằng trong 10 bang của Hoa Kỳ, nước giải khát Pepsi chứa 4-metylimidazol, một chất hóa học liên quan đến ung thư phổi ở động vật có vú. Hiện tại, Trung tâm Đánh giá Rủi ro Quốc gia đang đánh giá xem việc chứa 4-metylimidazol trong màu caramel của Coca-Cola có ảnh hưởng đến sức khỏe con người hay không. Ngoài ra, quốc gia này cũng dự định điều chỉnh tiêu chuẩn giới hạn cho màu caramel. Theo thông tin được biết, trong các tiêu chuẩn hiện hành về chất lượng thực phẩm tại Việt Nam, không có giới hạn cụ thể nào đối với màu caramel trong Coca-Cola, chỉ yêu cầu sử dụng theo nhu cầu sản xuất.

4-metylimidazol xuất hiện trong quá trình sản xuất màu caramelkèo bóng đá tối nay, được sử dụng rộng rãi trong công nghiệp thực phẩm như nước tương, giấm, Coca-Cola và đồ uống lạnh. Tuy nhiên, do quá trình sản xuất thường sử dụng amoniac hoặc muối amoni, khi phản ứng với các nguyên liệu khác, nó tạo ra phụ phẩm 4- Đây là chất độc thần kinh có khả năng gây co giật. Việc tiêu thụ lâu dài có thể dẫn đến ung thư ở động vật và tiềm ẩn nguy cơ gây ung thư ở người. Theo tờ Daily Mail của Anh, một tổ chức phi lợi nhuận đã kiểm tra hàm lượng 4-metylimidazol trong Coca-Cola của nhiều quốc gia và phát hiện rằng trong 355 ml Coca-Cola ở Mỹ là 4 microgram, tại Việt Nam là 56 microgram, ở Anh là 135 microgram và tại Brazil lên tới 267

Coca-Cola gây ung thư

Dưới đây là phương pháp phát hiện chi tiết của sắc ký lỏng hiệu suất cao (HPLC) đối với 4-metylimidazol trong màu điều.

1j88bet, Thiết bị và hóa chất

1.1 Thiết bị

Máy sắc ký lỏng LC-10Tvp

Cột sắc ký Vertex: 150mm x 4.6mm x 5µm

Cân phân tích

Máy cô đặc quay

Cốc phân phối 250ml

Máy rung lắc

Bộ lọc kim loại

Màng lọc microporous: 0.45µm

1.2 Hóa chất

Methanol (tinh khiết sắc ký)

Ethanol vô nước

Trichloromethan

Dung dịch chiết trích từ cloform và ethanol vô nước (80: 20): Lấy 80 ml cloform và 20 ml ethanol vô nướckèo bóng đá tối nay, trộn đều và dự trữ.

Natri cacbonat

Dung dịch natri cacbonat (100 g/L): Đigh lấy chính xác 100 g natri cacbonat vào bình định mức 1000 mlkèo bóng đá tối nay, thêm nước đến vạch mực.

Natri p-toluenesulfonat

Kali hydrophosphat

Photphoric acid

Dung dịch đệm kali dihydrophosphat (0kèo bóng đá tối nay,05mol/L): Cân 6,8g kali dihydrophosphat và 1g sulfat heptane, cho vào bình định mức 1000 ml, thêm 900 ml nước, điều chỉnh pH bằng axit phosphoric loãng đến 3,5, sau đó thêm nước đến vạch mực.

Chất chuẩn 4-metylimidazol: độ tinh khiết >99%

Dung dịch chuẩn dự trữ 4-metylimidazol: Cân chính xác 0j88bet,1000 g 4-metylimidazol vào bình định mức 100 ml, hòa tan bằng dung môi dòng chảy và định mức đến vạch mực. Nồng độ 4-metylimidazol là 1,0 mg/ml, làm dung dịch dự trữ.

2j88bet, Chuẩn bị dung dịch mẫu

Cân chính xác 3g mẫu (đúng đến 0kèo bóng đá tối nay,001 g), hòa tan trong 15 ml nước, chuyển vào cốc chia ly 250 ml, thêm 15 ml dung dịch natri cacbonat 100 g/L, thêm 60 ml dung dịch chiết trích cloform-ethanol vô nước, lắc mạnh trong 5 phút. Sau khi phân tầng, chuyển phần hữu cơ vào cốc chia ly khác, phần nước tiếp tục chiết lại theo cách tương tự, hợp nhất phần hữu cơ; rửa dung dịch chiết ba lần bằng dung dịch natri cacbonat 100 g/L, mỗi lần 30 ml. Sau đó, lọc dung dịch chiết qua natri sulfate vô nước vào chai cô đặc xoay, cô tại 50°C đến gần khô, lấy ra, hòa tan phần cặn bằng nước và định mức đến 10 ml, lọc qua màng vi lỗ 0,45µm trước khi phân tích bằng HPLC.

3, Điều kiện sắc ký

Cột: C18sòng bài trực tuyến, 4.6 mm x 250 mm, kích thước hạt 5 µm

Dung môi dòng chảy: Methanol: dung dịch đệm kali dihydrophosphat 0j88bet,05 mol/L (pH 3,5, chứa 0,1% sulfat heptane) = 5: 95.

Chiều dài sóng: 210nm

Lưu lượng: 1.0 mL/phút

4, Xác định mẫu

Đường chuẩn: Pha chế một loạt dung dịch chuẩn từ dung dịch chuẩn 4-metylimidazolj88bet, tiêm từng 10µl vào hệ thống HPLC, sau đó vẽ đường chuẩn bằng cách sử dụng diện tích đỉnh làm trục tung và hàm lượng 4-metylimidazol làm trục hoành.

Xác định mẫu: Tiêm 10 µL dung dịch mẫu vào hệ thống HPLCsòng bài trực tuyến, đo diện tích đỉnh, tìm hàm lượng 4-metylimidazol trong dung dịch thử từ đường chuẩn.

5, Sơ đồ sắc ký

Trở lại